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BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌绿色标记细胞 处理方法
发布时间:2020-07-05   点击次数:98次

上海琛艺实业有限公司新增细胞库,具有自己的研发细胞培养库,上千株细胞具有STR鉴定,开学大放送,价格优惠,同时还有好礼相送,具体欢迎咨询我们销售人员。。。。

产品名称:BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌绿色标记细胞 处理方法
·细胞数量: 1*10^6
·细胞种属: 人源
·生长特性: 贴壁
·培养基: DMEM-H
·形态特征: 成纤维细胞样
·传代方法: 1:3传代,2-3天传一代
·培养条件: 胎牛血清至最终浓度为10%。环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;温度,37℃
·细胞描述: 亲本L的亚克隆,是最早建立的连续传代细胞之一,L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+,HPRT+。
·细胞冻存: 液氮冻存(冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO)
·细胞运输: 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25瓶)
 
BxPC-3-GFP人原位胰腺腺癌绿色标记细胞 处理方法
形态特性 上皮细胞样  
生长特性 贴壁生长 

冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS  
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
细胞间期是为细胞分裂的准备时期,表现为细胞增大,营养物质增多。细胞分裂期则是一个细胞由两个细胞分解为一个细胞的过程。
细胞是生命的基本单位,细胞的特殊性决定了个体的特殊性,因此,对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。细胞生物学已经成为当代生物科学中发展快的一门尖端学科,是生物、农学、医学、畜牧、水产和许多生物相关专业的一门必修课程。
依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取 10 ml培养基加至 T25或 T75 flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25 或T75 flask 内之培养基, 混 合均匀,放入37 °C,5 % CO2 培养箱培养。
 
培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
 
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。
 
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
 
上海琛艺是一家专业从事细胞培养相关产品的公司,拥有独立细胞房(可随时约定参观),供应胎牛血清,STR鉴定细胞,感受态细胞等,专业,专注,性价比高,是您Shou选之家。

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