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人果糖16二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒促销

更新时间:2019-07-22

简要描述:

人果糖16二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒促销性能:
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:zui低检测浓度小于10 pg/ml。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

 

 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人幽门螺旋杆菌IgG(Hp-IgG)的含量。

  有效期:6个月

 保存条件:2-8℃

人果糖16二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒促销性能:

 1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
 2.灵敏度:zui低检测浓度小于10 pg/ml。
 3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
 4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人幽门螺旋杆菌IgG(Hp-IgG)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人幽门螺旋杆菌IgG(Hp-IgG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

人果糖16二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒促销性能:

 1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
 2.灵敏度:zui低检测浓度小于10 pg/ml。
 3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
 4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材

1.     酶标仪(450nm)

2.     高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.     37℃恒温箱

4.     蒸馏水或去离子水

 ELISA试剂盒试剂准备

在临床实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。因此在ELISA测定中试剂的准备zui为关键的是,在实验开始前,将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20分钟以上后,再进行测定,以使试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的,主要是为了在后面的温育反应步骤中,能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度,以满足测定要求。其次,目前的商品ELISA试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制,因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应保证质量。此外,当试剂盒以OPD为底物时,则底物溶液应在反应显色前临时配制。

人果糖16二磷酸醛缩酶(FDA)ELISA试剂盒原理性能:

 1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
 2.灵敏度:zui低检测浓度小于10 pg/ml。
 3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
 4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

ELISA试剂盒问题解析:

1.试剂的选择:选择优良试剂大家都是知道的,但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。

2.加样中可能遇到的问题:在做血清或是血浆用于检测试剂的时候,会碰到血清血浆不好分离的情况,这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时,然后在进行离心处理

3.洗板时容易造成误差: 因为洗板是人工洗的,所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的,这个时候带有主观色彩,所以多清洗几次,还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动

4.显色问题: 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长,都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候,要先查看显色剂本身的情况

5.终止反应:在加终止剂的时候由于倾倒速度快,差生气泡,造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒

6.读板:读板的时候首先应该保证板的清洁干净

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

ELISA试剂盒操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

 

试剂盒性能

1.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

2.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

注释:本公司所有产品仅用于科研,不得用于临床。

 

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