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人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒使用说明书

更新时间:2019-07-30

简要描述:

人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒使用说明书产品特点
1、灵敏度高:可检测浓度低于1.0pg/ml的细胞因子含量,结果可靠;
2、样本量少:检测样本只需50ul,是珍贵样本检测的理想选择;
3、操作简便:操作流程简单明确,且试剂盒包括实验所有必需试剂;
4、设备简单:使用常规标准化酶标仪检测(450nm)。

人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒使用说明书详细介绍:

包装规格:48T/96T

有效期:6个月

预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中相关物质含量。

1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

人ELISA试剂盒样本处理及要求:

1. Serum:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

人儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒使用说明书-elisa试剂盒组成】 

序号

名称

规格(96T×1)

规格(96T×2)

1.

酶标板

96T×1

96T×2

2.

酶标记物  (红盖)

11ml×1

11ml×2

3.

抗体工作液 (蓝盖)

5.5ml×1

11ml×1

4.

20X浓缩洗涤液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白盖)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑盖) 

6ml×1

11ml×1

7.

终止液  (黄盖) 

6ml×1

11ml×1

8.

阳性对照  (红盖)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

阴性对照  (绿盖)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

盖板膜

1张

2张

11.

自封袋

1个

1个

12.

说明书

1份

1份

 

【储存及有效期】 储存于阴凉干燥处(2-8℃),有效期期12个月。
    包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
【检验方法】
1.使用前将试剂盒置室温30分钟,恢复至室温。
2.取所需用量酶标板条,设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔,未用的板条尽快密封,2~8℃保存。
3.空白对照孔加样品稀释液100μl;阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl;样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。
4.混匀,置37℃(推荐水浴)反应30分钟。
5.扣去孔内液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,拍干。
6.每孔加酶标记物100μl(空白孔除外)。置37℃反应30分钟。
7.洗涤,同步骤5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混匀,37℃避光反应10分钟。
9.每孔加终止液50μl,混匀,用空白孔调零,于450nm(可用630nm作参比波长)测定各孔吸光值(A值)。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照≤0.10,阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明羊只抗体水平不足,建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
    该试验仅作为定性检测山羊血清、血浆中小反刍兽疫病毒抗体,根据A值高低可作抗体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行消毒隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以完全溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。

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