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小鼠黄体生成素(LH)ELISA试剂盒操作步骤

更新时间:2019-07-30

简要描述:

小鼠黄体生成素(LH)ELISA试剂盒操作步骤产品特点
1、灵敏度高:可检测浓度低于1.0pg/ml的细胞因子含量,结果可靠;
2、样本量少:检测样本只需50ul,是珍贵样本检测的理想选择;
3、操作简便:操作流程简单明确,且试剂盒包括实验所有必需试剂;
4、设备简单:使用常规标准化酶标仪检测(450nm)。

小鼠黄体生成素(LH)ELISA试剂盒操作步骤介绍:

包装规格:48T/96T

有效期:6个月

预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中相关物质含量。

1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。

2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。

3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。

4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。

人ELISA试剂盒样本处理及要求:

1. Serum:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

小鼠黄体生成素(LH)ELISA试剂盒操作步骤-elisa试剂盒组成】 

序号

名称

规格(96T×1)

规格(96T×2)

1.

酶标板

96T×1

96T×2

2.

酶标记物  (红盖)

11ml×1

11ml×2

3.

抗体工作液 (蓝盖)

5.5ml×1

11ml×1

4.

20X浓缩洗涤液

40ml×1

40ml×1

5.

底物液A  (白盖)

6ml×1

11ml×1

6.

底物液B  (黑盖) 

6ml×1

11ml×1

7.

终止液  (黄盖) 

6ml×1

11ml×1

8.

阳性对照  (红盖)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

9.

阴性对照  (绿盖)

1.0 ml×1

1.5 ml×1

10.

盖板膜

1张

2张

11.

自封袋

1个

1个

12.

说明书

1份

1份

 

【储存及有效期】 储存于阴凉干燥处(2-8℃),有效期期12个月。
    包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
ELISA试剂盒测定步骤:

固相包被→加待测样品→温育→洗刷+加酶标物→温育→洗刷→加底物→温育一加停止液→比色→判定成果。

ELISA试剂盒操作较繁杂,在操作中应留意以下5个方面。

1. 跟着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇,因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中,标本恰当稀释还可下降非特异性反响。

2. 加样一般运用加液器,在ELISA试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加停止液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和停止液时则不需更换吸嘴。

3. 在成批手艺检测中,还应留意操作时差的影响。加样及混匀时刻的差异,使抗原抗体反响和酶促反响时刻不*,对竞争法及定量检测影响很大,不留意可能会导致错误成果或定量不准。

4. 洗刷是ELISA试剂盒操作过程中决定试验胜败的一个关键步骤。意图是除去未结合的免疫反响物,停止抗原抗体反响,除去标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手艺洗板,前者洗刷质量较好,各反响孔洗刷作用均一,批内、批间差异小,手艺洗板应留意操控各孔洗刷作用,差异不宜太大。

5. 精确判定成果须运用ELISA试剂盒测读仪,比色法判读可选择单波长或双波长,依据反响液色彩的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。酶标仪具有杰出的重复性。

标签:elisa试剂盒的说明书

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