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K7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨细胞 含STR鉴定

更新时间:2019-07-30

简要描述:

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。
【中文名称】K7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨细胞 含STR鉴定
【背景资料】 见细胞说明书
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、J

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

【中文名称】K7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨细胞 含STR鉴定

【背景资料】 见细胞说明书

【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养FBS

量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高FBS量到15%, 细胞待细胞稳定后,调回FBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细胞活力。

 

  • 售前
        上海琛艺专业为国内科研提供高品质细胞和优质服务,QC检测合格后发货保证细胞状态良好,发货前保证质量。
     
    二、售后
        收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈,会有技术同步指导操作协助解决,如仍未养活免费重发。建议及时保种,有备无患!
     
    三、细胞生长条件:

 

细胞系使用说明书

细胞名称

K7M2-WT小鼠骨肉瘤成骨细胞 含STR鉴定

细胞背景

在PEG胁迫下,将原代培养的人脐静脉细胞与抗硫鸟嘌呤的A549克隆株融合,构建了人脐静脉细胞株, EA.hy926。融合子在HAT培养基上生长并以八因子相关抗原筛选。EA.hy926已经过100次以上的群体倍增(PDLs)。电镜照片显示Weibel-Palade小体的细胞质分布以及组织特异性的细胞器,分化的内皮细胞特性如血管生成,体内平衡/血栓形成,血压及炎症反应。

货号

CY1002

种属

细胞用途

仅供科研使用

生长特性

贴壁

培养

培养基:90%DMEM(高糖)+10%FBS

温度:37℃     气相:95%空气,5%二氧化碳

细胞特性

 

1)  来源:体细胞融合细胞

2)  形态:内皮细胞样,贴壁生长

3)  含量:>1x106 /mL

4)  污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5)  规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

 

细胞培养步骤

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1.     弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.     2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.     6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4.     收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按12的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:21:5的比例进行。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。

下面T25瓶为例;

1     细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2     1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。

3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

保存

冻存条件:90%完全培养液+10%DMSO

(备注:建议使用本公司的冷冻液(H-W-100),4度保存的冷冻液直接重悬细胞,不能预热后使用。)

保存条件:液氮存储

常见问题及解决方案

1.培养瓶有破裂,培养液有漏液:细胞极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。

2.收到细胞后尽快更换为含 10%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基,请在原瓶培养基中额外添加 10%的血清(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时)

3.细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。1-2小时后观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留8-10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

 

上海琛艺细胞培养的优点:

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备  

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广,如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等; 

适用的对象范围广,从低等动物到高等动物,一种动物的不同年龄阶段以及不同组织,都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

 

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