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鸡胃蛋白酶(PP)ELISA检测试剂盒厂家

更新时间:2019-08-09

简要描述:

中文名称:鸡胃蛋白酶(PP)ELISA检测试剂盒厂家
ELISA试剂盒规格:96T/48T
ELISA试剂盒品牌:琛艺酶科
种属:人ELISA试剂盒
所需样本体积:50-100ul
ELISA试剂盒适用范围:仅供科研
库存:现货
保存及有效期:2-8℃,六个月
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。
例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑斧液、细胞培养上清

包装规格:48T/96T

检测方法:酶联免疫

检测标本:血清、血浆、尿液、组织匀浆等

本试剂盒仅供科研使用!

鸡胃蛋白酶(PP)ELISA检测试剂盒厂家-elisa试剂盒组成

 

        名  称

96孔配置

12孔×8条

48孔配置

12孔×4条

备  注

 1

标准品(500ng/ml)

0.5ml

0.5ml

稀释即用型

 2 

酶标包被板

1块

1块

已包被即用型

 3

标准品稀释液

3ml

3ml

即用型

 4

链霉亲和素-HRP

6ml

3ml

即用型

 5

30x倍浓缩洗涤液

20ml

20ml

蒸馏水稀释

 6

生物素标记抗体

2ml

2ml

即用型

 7

显色剂A液

6ml

3ml

即用型

 8

显色剂B液

6ml

3ml

即用型

 9

终止液

6ml

3ml

即用型

10

说明书

1份

1份

即用型

11

封板膜

2张

2张

不可反复使用

12

密封袋

1个

1个

即用型

需要而未提供的试剂和器材

1.   酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片) 。

2.   洗板机(可调注液量,保证每孔洗液加至0.35ml而不溢出)。

3.   超净工作台,生物安全柜,通风柜。

4.   高精度单道加液器(量程为0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).

5.   高精度多道加液器(8道或12道,量程为50-300μl).

6.   37℃恒温箱。

7.   低温离心机。

8.   电冰箱(4℃,-20℃,-86℃).

9.漩涡混合仪,低频振荡器等

鸡胃蛋白酶(PP)ELISA检测试剂盒厂家-ELISA试剂盒科研实验操作中常见问题:

血清标本可按常规方法采集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。本文将叙述板式ELISA试剂盒各个操纵步骤的留意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照划定操纵,必能得出正确的结果。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可溅出,不可产气愤泡。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清,可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。
    在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血*收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体 或抗原成份,ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。  
    ELISA试剂盒的操纵因固相载体的形成不同而有所差异,海内医学检修一般均用板式点。除特殊情况外,在医学检修中均以血清作为检测标本。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴,以发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。优质的试剂,良好的仪器和准确的操纵是保证ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要条件。ELISA顶用的蒸馏 水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定(如血清 、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。

样本要求

1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存或根据存放,时间做相应温度调整,但应避免反复冻融,(由于样本种类过多,每个单位处理方式不一样,本说明书不做详细介绍)。

 

操作程序

1. 标准品的稀释:(本试剂系统提供原倍标准品一支,用户请按照说明自行在小试管中倍比稀释)按下表格执行:

 250ng/ml

(5号标准品)

120μl的原倍标准品加入120μl的标准品稀释液

 125ng/ml

(4号标准品)

120μl的5号标准品加入120μl的标准品稀释液

   62.5ng/ml

(3号标准品)

120μl的4号标准品加入120μl的标准品稀释液

  31.2ng/ml

(2号标准品)

120μl的3号标准品加入120μl的标准品稀释液

  15.6ng/ml

(1号标准品)

120μl的2号标准品加入120μl的标准品稀释液

 

2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样:(详细操作流程请联系客服索要说明书)

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 显色:每孔先加入显色剂A 50μl,再加入显色剂B 50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟。

7. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

8. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后10分钟以内进行。

 

结果判断

1.每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。(若不减零孔值,标准曲线的零孔应相交于Y轴)

2.根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种熟悉应用软件来计算。

3.手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。推荐使用专业制作曲线软件进行分析计算结果。

4.若标本OD值高于标准曲线上限,应适当稀释后重测,计算浓度时应乘以稀释倍数。

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