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小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒说明书

更新时间:2019-08-15

简要描述:

小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒说明书
种属:大鼠ELISA试剂盒
检测波长:450 nm
所需样本体积: 50-100ul
保存及有效期:2-8℃,六个月
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
上海琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物

小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒说明书

双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体含量。

液体类标本:
包括血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清液等。
血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中如有沉淀,请再次离心。
血浆:
应根据标本的要求选择EDTA,柠檬酸钠或者肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,在离心20分钟(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中有沉淀,请再次离心。
尿液:
用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中有沉淀,请再次离心。
细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,当细胞浓度达到100万/ml左右,通过反复冻融,使细胞破坏并释放细胞内的成份,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,如保存过程中有沉淀,请再次离心。
组织标本:
切割标本后,称取重量,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷冻保存备用,标本融化后仍保持2-8℃的温度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分,离心20分钟左右(2000-3000转/分),仔细收集上清,分装后留一份待检测,其余冷冻备用。

小鼠白介素9(IL-9)ELISA试剂盒说明书-ELISA的基本原理有三条: 
(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性; 
(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。  

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人ELISA试剂盒操作步骤
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37
温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37
温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37
℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。

人ELISA试剂盒局限
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。

人ELISA试剂盒试剂盒性能
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

人ELISA试剂盒结果判断与分析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的待测物质标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的待测物质含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

elisa试剂盒的组成: 

(1)结合物及标本的稀释液;
(2)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(3)酶标记的抗原或抗体(结合物);
(4)酶的底物;
(5)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),elisa试剂盒参考标准品和控制血清(定量测定中);
(6)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂)
用途:科研与实验专用试剂,不得用于临床诊断。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 

  

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