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SHG-44-GFP人神经胶质瘤细胞-绿色标记STR

更新时间:2019-08-20

简要描述:

【中文名称】SHG-44-GFP人神经胶质瘤细胞-绿色标记STR培养说明
【背景资料】 见细胞说明书
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
“公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养FBS
量是10%

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

产品名称:SHG-44-GFP人神经胶质瘤细胞-绿色标记STR培养说明含STR鉴定报告
规格:70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点:细胞代数为4代以内,细胞耐药倍数8倍以上;
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!

  • SHG-44-GFP人神经胶质瘤细胞-绿色标记STR培养说明已通过STR鉴定报告
  • 三、细胞生长条件:

 

细胞系特征

生长特性:悬浮生长

微生物及支原体检测:阴性

安全性:所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。

培养条件:

 

 

 

完全培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml FU

GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。

培养条件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

传代方法:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,低速离心,打开细胞培养瓶,吸出培养液(注意不要吸出细胞),换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 低速离心,弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中(补加完全培养基至8到10ml)。如果没有特别说明,收到细胞后的*次传代一般是一传二。

注:1、观察细胞在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。

冻存方法:

  冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO

  储存:液氮储存

   

 

做细胞实验的同学看过来。

选择上海琛艺生物细胞有3个理由:

1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验,效果更佳。

 专业技术人员万工收藏的细胞培养小技巧:

1. 买细胞要去靠谱的地方买,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍,这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。

2. 不管是买的细胞,还是别人惠赠的细胞,刚拿到手赶紧的做两件事:检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存,冻存细胞复苏后第二天蕞好更换一次培养基。

3. 发现细胞有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。

4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快,比如说 MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢,比如 BT474,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。

5. 对于娇弱的细胞,就得细心呵护。胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住,是每天。

上海琛艺万工告诉您怎么样正确复苏细胞:

   细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?不罗嗦了,请看下文:

    活力检查 – 千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!

    形态检查 – 检查细胞的固有形态和生长行为。

好了,开始切入正题

冻存细胞:

补充新的培养液 – 在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。

    在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度 ~5 x106 cells/ml (根据不同的细胞类型调整)

冻存液 – 用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有):

– 5-10% DMSO – 注意确保DMSO不含有其他的毒性物质。

– 5-15% 甘油

– 如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。

    在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml.

程序降温是保证冻存细胞活性的关键,使用 Mr. Frosty(找生物注一种装置)保证降温速度为1°-3°C,置于-80°C冰箱内过夜,如果没有Mr. Frosty装置,可以使用实验室常见的泡沫盒、棉花等(原文是实验室尿布,呵呵,不知道是什么鸟)。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以zui快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!

    还有一个zui重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!

细胞复苏-正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:

    当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要(找生物注国内这个方面做得非常不好吧)从液氮内转移冻存管至热的(温度高的)容器内,应在液氮内完成。应该与37℃水浴中快速溶解冻存的细胞,并保证冻存管盖子在水面之上以避免污染。当zui小的冰块溶解后,用70%酒精擦拭冻存管,并迅速转移至新的已经预热的培养基内。观察细胞生长形态和生长比率。其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜,尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。

上海琛艺实业耐药细胞株提供STR鉴定,上百株细胞等待您的选购,欢迎咨询销售陈静。

 

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