更新时间：2023-05-09
【中文名称】KYSE450-GFP人食管癌-绿色标记STR【背景资料】 见细胞说明书【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系“公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性，一般细胞培养FBS量是10%
| 品牌 | 自营品牌 | 货号 | KYSE450-GFP |
|---|---|---|---|
| 规格 | T25瓶 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | KYSE450-GFP细胞大学与医院科研 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,石油 |
上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株，其中人的已通过STR鉴定的有几百株，欢迎各位选购。。。。。。
产品名称：KYSE450-GFP人食管癌-绿色标记STR培养说明含STR鉴定报告
规格：70%密度的25cm2培养瓶的细胞一瓶
特点：细胞代数为4代以内，细胞耐药倍数8倍以上；
包装：内层无菌自封袋；防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书
细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC
货期：1-2周
运输方式：快递运输
售后：收到细胞后12天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员，我们将尽快为您解决！
细胞系特征 | ||
生长特性：悬浮生长 微生物及支原体检测：阴性 安全性：所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。 | ||
培养条件：
| *培养基：90%RPMI-1640+10%胎牛血清+0.1ug/ml FU GIBCOFBS-10099-141或HYCLONEFBS-SH30084.03。 培养条件：37.0C carbon dioxide(CO2),5% | |
传代方法：
| 收到细胞后，在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 （一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，低速离心，打开细胞培养瓶，吸出培养液（注意不要吸出细胞），换 10ml新鲜培养液后继续培养。 (二)如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 低速离心，弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 按6-8ml/瓶补加*培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中（补加*培养基至8到10ml）。如果没有特别说明，收到细胞后的*次传代一般是一传二。 注：1、观察细胞在低倍镜（4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。 2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。 3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。 4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。 | |
冻存方法： | 冻存液：90%胎牛血清，10%DMSO 储存：液氮储存 | |
做细胞实验的同学看过来。
选择上海琛艺生物细胞有3个理由：
1、细胞状态好，形态佳，易成活，是市面上比较好养的细胞之一;
2、物流迅速，复苏好后发货，次日就能到;
3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验，效果更佳。
专业技术人员万工收藏的细胞培养小技巧:
1. 买细胞要去靠谱的地方买，比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面会有针对细胞的介绍，这样培养之前可以了解细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2. 不管是买的细胞，还是别人惠赠的细胞，刚拿到手赶紧的做两件事：检测是否有支原体污染;迅速扩增冻存，冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。
3. 发现细胞有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时。细菌污染、真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，可以买个支原体检测的试剂盒定期检测一下。
4. 不同细胞生长周期不同。有的生长很快，比如说 MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了。有的又是特别慢，比如 BT474，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满。这就需要要在培养细胞的过程中多多摸索。
5. 对于娇弱的细胞，就得细心呵护。胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间。每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。记住，是每天。
上海琛艺万工告诉您怎么样正确复苏细胞：
细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢?没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?不罗嗦了，请看下文：
活力检查 – 千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!
形态检查 – 检查细胞的固有形态和生长行为。
好了，开始切入正题
冻存细胞：
补充新的培养液 – 在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。
在细胞长至70%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度 ~5 x106 cells/ml (根据不同的细胞类型调整)
冻存液 – 用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择zui合适的冻存液(常用的冻存液成分有):
– 5-10% DMSO – 注意确保DMSO不含有其他的毒性物质。
– 5-15% 甘油
– 如果细胞在无血清培养基内生长，应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。
在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过1.5ml.
程序降温是保证冻存细胞活性的关键，使用 Mr. Frosty(找生物注一种装置)保证降温速度为1°-3°C，置于-80°C冰箱内过夜，如果没有Mr. Frosty装置，可以使用实验室常见的泡沫盒、棉花等(原文是实验室尿布，呵呵，不知道是什么鸟)。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以zui快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！
还有一个zui重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题!
细胞复苏-正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：
当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要(找生物注国内这个方面做得非常不好吧)从液氮内转移冻存管至热的(温度高的)容器内，应在液氮内完成。应该与37℃水浴中快速溶解冻存的细胞，并保证冻存管盖子在水面之上以避免污染。当zui小的冰块溶解后，用70%酒精擦拭冻存管，并迅速转移至新的已经预热的培养基内。观察细胞生长形态和生长比率。其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜，尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
上海琛艺实业耐药细胞株提供STR鉴定，上百株细胞等待您的选购，欢迎咨询销售陈静。
021-39598508
