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MGC-823-GFP人低分化前胃癌细胞-绿色标记

更新时间:2019-08-25

简要描述:

产品名称:MGC-823-GFP人低分化前胃癌细胞-绿色标记
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

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产品名称:MGC-823-GFP人低分化前胃癌细胞-绿色标记

包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!

  • MGC-823-GFP人低分化前胃癌细胞-绿色标记
  • 三、细胞生长条件:

 

  • 组成:

组份

数目

细胞

 1 T-25瓶

细胞说明书

一份

  • 细胞简介:

生长特性:

贴壁生长

 

细胞来源:

从ATCC/中科院/协和医院等地引进

培养条件:

培养基:1640 +10%FBS(推荐德国BI 04-002-1A

优等胎牛血清)

气相:空气95%,二氧化碳5%

温度:37℃

培养:

  • 贴壁细胞

1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲,.然后置于无菌操作台,打开瓶口,将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代;

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%,需要对其进行传代,*次传代比例为1:2。

3传代步骤:将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(*次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为zui佳消化时间,记录zui佳消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。

 

二、悬浮细胞

1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒,然后置于无菌操作台,打开瓶口,轻轻吹打后,将其中的细胞悬液转移到离心管中,然后1200rpm离心3min,去上清;

2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鲜培养基,然后将其置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液(离心后去旧液,加入新鲜培养基);

3.显微镜观察细胞数目比较多时,对其进行传代,*次传代比例为1:2(离心后平均分成两瓶培养)。

 

细胞总数:

1~3*106

传代周期:

2-3天

传代比例:

1:2~1:4

换液频率:

2-3天

冻存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事项:

1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养

3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。

4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。

 

做细胞实验的同学看过来。

选择上海琛艺生物细胞有3个理由:

1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验,效果更佳。

 有关细胞有丝割裂的试验方法

(一)试验原理
    
细胞有丝割裂指数(mitotic index,MI)是指归于割裂期的细胞占总细胞数的百分率.用于表明细胞增殖旺盛的程度,也可用于检测药物对细胞增殖能力的影响。用盖玻片培育法培育细胞,做固定和染色后,镜下调查和计数1000个细胞中处于割裂期的细胞数并核算MI。

(二)资料

1.待检资料(药物)。

2.细胞培育成层的贴壁细胞。

3.试剂 甲醇、3%吉姆萨染液。

4.器件CO2培育箱、倒置显微镜、盖玻片(2.2 cm×2.2 cm,需预先清洗和灭菌处理)、塑料培育皿(3.5 cm)、载玻片、封片用盖玻片、中性树胶。

(三)试验方法

1.将细胞消化成单个细胞悬液,将细胞悬液分瓶培育,分成不加药的对照组和加人不同剂量药物的试验组。

2.细胞传代培育的方法培育细胞,并制成浓度为105/ml的细胞悬液。

3.将清洗和灭菌处理的盖玻片放置在塑料培育皿中,将细胞悬液摇匀后接种于培育皿中,各皿中接种量相同。

4.分别于培育24 h、48ht和72h后从培育皿中取出盖玻片,在Hanks液中漂洗2~3次。

5.先用甲醇固定30 min,再用吉姆萨染液染色。晒干后用中性树胶封片。

6.油镜下或高倍镜下计数1000个细胞中处于割裂期的细胞数。

7.核算MI按下列公式核算MI。

(四)成果与分析
    
将对照组和药物组的试验成果绘制成直方图并加以比较,也可绘制成MI曲线进行比较:

(五)注意事项

1.为了削减差错,试验者有必要了解各期割裂象细胞的形状特征,该试验自始至终由一人完结,当两人以上调查时,应掌握相同的标准。

2.MI曲线与细胞生长曲线趋势根本相似,但不彻底相同。如果在细胞增长达饱满密壁并进入中止期后.细胞数量许多,而割裂象细胞可彻底消失。

3.细胞在盖玻片上的密度常不均匀,细胞密集区与区的割裂象细胞数目或许不同。计数时要选择密度近似区,以削减试验差错。

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