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人冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒使用说明书

更新时间:2023-05-09

简要描述:

人冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒使用说明书
(1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
(2)C的抗原或抗体(结合物);
(3)酶的底物;
(4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
(5)结合物及标本的稀释液;
(6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水;
(7)酶反应终止液,常用的HRP反应终止液为硫酸,其浓度

品牌自营品牌货号琛艺elisa试剂盒厂家
规格48T/96T供货周期现货
主要用途科研ELISA试剂盒实验应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,石油

elisa试剂盒价格,物美价廉,量大从优,部分ELISA试剂盒*销售。

ELISA试剂盒参数规格

【产品名称】:人冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒使用说明书

【供货期】:1-3天(现货供应)

【产品用途】:被测样品定性定量分析

【产品规格】:96T/48T(两种规格)

【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】:2-8℃

【产品性状】:液体盒装

【产品价格】:(含税含运费,我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等

同时上海琛艺可以代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、猪、鸡、犬、猴子、羊、牛等种属elisa实验。

 

人冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒使用说明书标本要求

1. 血清:温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2. 血浆:根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或其他作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3. 尿液:无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂,用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

ELISA试剂盒实验原理验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

ELISA试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、30、60、120、240、480 U/ml

ELISA试剂盒性能

 

试剂盒性能

1.  检测范围:1.5 U/L – 48 U/L。

2.  灵敏度:zui低检测浓度小于0.1 U/L。

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

 

ELISA试剂盒的特点
1. 高效、灵敏、特异的抗体;

2. 稳定的重复性和可靠性;

3. 吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

 

ELISA试剂盒操作示意图如下: 

 

ELISA试剂盒洗涤液中的非离子去除方式

 ELISA试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时又应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA试剂盒操作中,洗涤是主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。洗涤的方式除某些ELISA试剂盒仪器配有特殊的自动洗涤仪外,手工操作有浸泡式和流水冲洗式两种,

  (1)浸泡式a.吸干或甩干孔内反应液;b.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);c.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;d.吸干孔内液体。吸干应*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;e.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。微量滴定板多采用浸泡式洗涤法。洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水溶液状态,从而脱离固相载体。其浓度可在0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。

  (2)流水冲洗式流水冲洗法初用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为*,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。

 

操作指南:

固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果

上海琛艺实业有限公司涉足新的生物领域ELISA试剂盒,ELISA试剂盒研发的种属涵盖:人,大鼠,小鼠,猪,牛,羊,兔,植物,农残类,鱼类等。公司常备现货gibco10270-106胎牛血清,BI胎牛血清04-001-1cas,上百株人的细胞带STR鉴定,具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有竞争力的价格。公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。

 

上海琛艺实业集技术、销售为一体,需要ELISA试剂盒的,或者代做检测的

琛艺可以为您免费代测,有任何问题可联系我司销售专员陈静。。。。


 

 

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