猪载脂蛋白A1（apo-A1）ELISA试剂盒操作步骤

elisa试剂盒价格，物美价廉，量大从优，部分ELISA试剂盒*销售。

ELISA试剂盒参数规格

【产品名称】：猪载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒操作步骤

【供货期】：1-3天(现货供应)

【产品用途】：被测样品定性定量分析

【产品规格】：96T/48T(两种规格)

【检测方法】：酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】：2-8℃

【产品性状】：液体盒装

【产品价格】：(含税含运费，我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测)

【销售优势】：价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】：体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等

同时上海琛艺可以代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、猪、鸡、犬、猴子、羊、牛等种属elisa实验。

猪载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒操作步骤标本要求

1. 血清：温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2. 血浆：根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或其他作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3. 尿液：无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或组织蛋白萃取试剂，用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

ELISA试剂盒实验原理验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被小鼠D-乳酸脱氢酶（D-LDH）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠D-乳酸脱氢酶（D-LDH）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

ELISA试剂盒组成

注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、30、60、120、240、480 U/ml

ELISA试剂盒性能

试剂盒性能

1.  检测范围：1.5 U/L – 48 U/L。

2.  灵敏度：zui低检测浓度小于0.1 U/L。

3.  特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。

ELISA试剂盒的特点
1. 高效、灵敏、特异的抗体；

2. 稳定的重复性和可靠性；

3. 吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；

ELISA试剂盒操作示意图如下： 

选对，用对，ELISA试剂盒才能事半功倍！

ELISA试剂盒的正确选购与运用尤为重要。尤为是关于新手而言，掌握ELISA试剂盒的选购与运用方面的知识更为重要。

一、ELISA试剂盒选购技巧

试剂盒的应用种属、检测样本的品种：除试剂盒特别阐明外，一般不同种属不能通用。常见待测样本品种有：血清和血浆（不同抗凝剂），细胞上清，和细胞裂解液，试剂盒中不同样本的稀释液不混用；

试剂盒的检测规模：也便是标曲规模，要留意待测样本浓度是否落在标曲规模内，关于浓度很高的样本，能够先进行预实验摸索到比较好的稀释倍数后再大量测定样本。 

二：ELISA试剂盒中的稀释线性及回收率：

a、稀释线性一般指样本稀释线性，是将样本梯度稀释下来，看各稀释梯度浓度是否成线性；参阅样本稀释线性能够挑选样本的较佳稀释倍数；

b、稀释线性也有做加标稀释线性的情况，加标稀释线性是将规范品参加样本中测定参加的规范品浓度测定是否准确；同样也是确定待测样本稀释倍数的参阅目标。一般线性和回收率的规模在80%-120%比较适宜； 

三：ELISA试剂盒的其它目标：

a、灵敏度：试剂盒能够检测到的样本低浓度的才能，假如待检目标含量很低，需求挑选高灵敏度的ELISA试剂盒；

b、板间和板内的变异系数（CV%）:反映板内和不同板之间是否均匀，CV%一般小于10% 比较好。

c、试剂盒的有效期：试剂盒的有效期一般是半年至一年，样本预备时刻需求考虑到试剂盒的有效期。

四、ELISA试剂盒运用技巧

样本的预备：尽量运用新鲜样本，不运用有溶血，被细菌污染、标本保存时刻过长和标本凝固不全的样本。ELISA检测宜收集新鲜标本，如不能当即测定，5天之内应4℃保存，关于1周后检测的样本应低温冻存；做好分装，长期冻存的样本避免重复冻融。

仔细阅读阐明书，了解整个流程，引荐画出扼要步骤图；提前预备试剂，比方常见20X洗涤液是浓缩液，需求用超纯水提前稀释预备好。一般的检测抗体和酶标二抗需求用对应的稀释液稀释至工作浓度。不同批次的试剂不要混用，查看各组分的有效期。

预包被的酶标板条和各试剂组份需求室温平衡30 min以上，这样做的意图能使反响微孔内的温度较快地达到所需温度，预防后续实验中因为孵育温度或是时刻不够充沛，而将一些弱阳性样本不能检出。

待测样本加样：待检样本过多时，建议分批操作；需求稀释的样本提前做好稀释，留意选对适宜稀释液；控制好加样时刻，避免加样费时过长造成差错；留意加样视点，笔直参加孔底，不要接触孔壁, 做到一份样本一个移液头，避免交叉污染。 

五：ELISA试剂盒温育和洗板

温育时刻和温度一般依据试剂盒的阐明书进行挑选。温育时能够选用水浴或许湿盒孵育,避免“边缘效应”。

①手工洗板时，决定时要笔直，避免交叉污染，用力不能过猛，避免抗原抗体复合物脱离；

②洗板机洗板时应常常查看冲洗头是否通畅。

显色：市售ELISA试剂盒中，一般是以四甲基联苯胺(TMB)为底物的显色液，反响条件为37℃或室温反响15～30 min。显色反响需求避光。

读数和数据剖析：终止后读取结果尽量在15min内完成，读取OD值时酶标仪需先预热15～30 min再进行。数据剖析一般用四参数和直线拟合法，挑选哪种拟合方式，能够依据标曲的相关系数（R2）来确定，R2一般需求大于0.99。

操作指南：

固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果

上海琛艺实业有限公司涉足新的生物领域ELISA试剂盒，ELISA试剂盒研发的种属涵盖：人，大鼠，小鼠，猪，牛，羊，兔，植物，农残类，鱼类等。公司常备现货gibco10270-106胎牛血清，BI胎牛血清04-001-1cas，上百株人的细胞带STR鉴定，具有完善的实验技术开发平台，成熟的抗原、抗体研发系统，熟练掌握各种酶联技术，结合公司的研发团队，可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性，同时又具有竞争力的价格。公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒，各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类产品，产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。

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