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猪纤维介素蛋白(FGL2)ELISA试剂盒促销

更新时间:2019-09-05

简要描述:

猪纤维介素蛋白(FGL2)ELISA试剂盒促销
1.血清标本收集、处理、保存方法:
用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,全血标本室温放置1-2h或4℃过夜,然后4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。
2.血浆标本收集、处理、保存方法:
根据样本要求选择EDTA或肝素钠

上海琛艺实业有限公司涉足新的生物领域ELISA试剂盒,ELISA试剂盒研发的种属涵盖:人,大鼠,小鼠,猪,牛,羊,兔,植物,农残类,鱼类等。公司常备现货gibco10270-106胎牛血清,BI胎牛血清04-001-1cas,上百株人的细胞带STR鉴定,具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有竞争力的价格。公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。

公司产品进入。。。。

【产品名称】:猪纤维介素蛋白(FGL2)ELISA试剂盒促销

【供货期】: (现货供应)

【产品用途】:被测样品定性定量分析

【产品规格】:96T/48T(两种规格)

【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)

【保存条件】:2-8℃

【产品性状】:液体盒装

【产品价格】:我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测

【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退

【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。

例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑斧液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠白介素1α(IL-1α)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠白介素1α(IL-1α)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

猪纤维介素蛋白(FGL2)ELISA试剂盒促销样本处理及要求

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。


标本处理

1.  本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。

2.  实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。

3.  若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。

4.  使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。

5.  若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。

6.  某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。

7.  建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。

 

需要而未提供的试剂和器材

  • 酶标仪(450nm)
  • 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  • 37℃恒温箱
  • 蒸馏水或去离子水

 

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

8孔×12条

8孔×6条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

备注:

1.  标准品浓度依次为:48、24、12、6、3、0 pg/mL

2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过zui大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

 

注意事项

  • 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
  • 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
  • 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
  • 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
  • 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
  • 在储存和温育时避免强光直接照射。
  • 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
  • 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
  • 不能使用过期产品。
  • 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

 

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

 

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

 

试剂盒性能

在一般的概念里,ELISA检测试剂盒技术的可性强,不需复杂设备,甚至完全手工加样、洗板和肉眼判读结果,便可完成该技术的操作。随着人们对质量控制意识的加强,尽可能做到最低限度的减少系统误差,以及减少劳动强度等观念的不断改进,解决ELISA技术中加样、温育、洗板及判读结果过程的系统误差问题及高效率运作问题导致了自动化概念的形成。ELISA技术的加样、温育、洗板及判读结果过程的科学地、有机地、系统地结合,ELISA检测试剂盒尽可能地减少各环节的人为因素的影响,便成为自动化ELISA技术的理论基础。温育系统主要由加温器及易导热的金属材料板架构成O有些是盒式的,有些是台式的O一般控制的温度可在室温-50℃之间。温育时间及温度设置是由控制软件需确调控的。 
    洗板系统是整个体系的重要组成部分,主要由支持板架、洗液注入针及液体迸出言路等组成。洗液注入针一般是8头的。每项洗板的洗板残留量一般控制在5µL以内。最*设备可控制在2µL内。洗板次数可通过软件控制实现并可更改次数。 
    读板系统由光源、激光片、光导纤维、镜片和光电倍增管组成,是酶促反应最突结果客观判读的设备。各型号仪器的比色探头配置不一样,ELISA检测试剂盒有单头的3也有8头的。控制软件通过机械臂和输送轨道将酶标板送入读板器进行自动比色,再将光信号转变成数据信号又回送到软件系统进行分析。 
    酶标板的移动靠机械臂或轨道运输系统来完成。机械臂的另一重要功能是移动抽样针O机械系统的运动受控子控制软件,其运动非常地精确和到位。

问题解答

若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后我公司为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:

问题

可能原因

解决方案

标准曲线差

吸取及洗涤不充分

充分的吸取及洗涤

移液不精确

检查和校正移液器

精密度低

洗涤不充分

按说明书要求充分洗涤和浸泡

混匀不充分和吸取试剂不足

充分混匀和吸取试剂

重复利用吸头、容器和覆膜

使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜

加样不精确

检查和校正移液器

O.D值低

每孔加的试剂量不精确

校正移液器,精确加入试剂

温育时间不正确

保证充足的温育时间

温育温度不正确

试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度

酶标记物或底物失效

通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查

没有加入终止液

按照说明书实验操作步骤加入终止液

超出读数时间读数

在说明书推荐的读数时间内读数

样本值

不正确的样本储存方式

正确储存样本,使用新鲜样本进行实验

不正确的样本收集和处理方法

采取正确的样本收集和处理方法

待测物质在样本中含量低

使用新鲜样本,重复实验

 

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