更新时间:2023-05-09
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒作用1.血清标本收集、处理、保存方法:用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,全血标本室温放置1-2h或4℃过夜,然后4℃、3000rpm/min离心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(较长时间),避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂的标本。2.血浆标本收集、处理、保存方法:根据样本要求选择EDTA或肝素钠
品牌 | 自营品牌 | 货号 | 人elisa试剂盒 |
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规格 | 48T/96T | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 生命科学院医院及学校elisa试剂盒的实验 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,石油 |
上海琛艺实业有限公司涉足新的生物领域ELISA试剂盒,ELISA试剂盒研发的种属涵盖:人,大鼠,小鼠,猪,牛,羊,兔,植物,农残类,鱼类等。公司常备现货gibco10270-106胎牛血清,BI胎牛血清04-001-1cas,上百株人的细胞带STR鉴定,具有完善的实验技术开发平台,成熟的抗原、抗体研发系统,熟练掌握各种酶联技术,结合公司的研发团队,可以有效的保证公司产品强的稳定性和高的准确性,同时又具有竞争力的价格。公司目前主要提供生化试剂、分子生物学试剂及试剂盒,各种抗体及免疫学试剂盒、实验耗材等多门类产品,产品涉及分子生物学、细胞生物学、免疫学等生命科学的各个领域。
【产品名称】:人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒作用
【供货期】: (现货供应)
【产品用途】:被测样品定性定量分析
【产品规格】:96T/48T(两种规格)
【检测方法】:酶免法/酶联免疫法(ELISA)
【保存条件】:2-8℃
【产品性状】:液体盒装
【产品价格】:我们全程提供ELISA实验技术指导和ELISA试剂盒免费代测
【销售优势】:价格行业优势、质量可靠、如果出现客观质量问题包换退
【待检样本】:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。
例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑斧液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等
二.实验原理
免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合反应,所以任何优质的诊断试剂离不开优质的原料,如抗原抗体,酶等。以前用于免疫测定的抗原通常为各种纯化抗原,而抗体则为纯化抗原免疫动物后获得的多克隆抗体和使用杂交瘤技术得到的单克隆抗体,而抗原或抗体的标记物如酶标结合物则通过各种化学合成方法制备。近年来,随着分子生物学的发展,使用基因工程方法制备各种特殊的抗原或抗体及其酶结合物等免疫测定试剂几成为现实的新一代试剂,各种新型使用的测定方法也不断出现。
人阿拉伯半乳糖蛋白(AGPs)ELISA试剂盒作用样本处理及要求
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
标本处理
1. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2. 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
3. 若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4. 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5. 若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6. 某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7. 建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
ELISA实验结果不理想莫慌张
ELISA实验中难免会出现错误,实验结果不理想也时有发生,遇到这样的事情不要慌张,尽量找出解决问题的方法,今天就让上海劲马与您一起分享一下有哪些原因会使ELISA实验的结果不理想,和常见的解决方案。
一,生物实验室的污染
生物实验室产生的废液污染主要是化学性污染和生物性污染,另外还有放射性污染。我们经常认为实验室中的有机试剂并不直接参与发生反应,仅仅起溶剂作用,因此就直接把消耗的有机试剂以各种形式排放到周边的环境中,排放总量大致就相当于试剂的消耗量,然而日复一日,年复一年,这样累积下来的排放量就十分可观了。
二,ELISA试剂盒花板现象
关于ELISA试剂盒结果“花板"的问题对检测数据造成了很大影响,往往会使检测者做出误判,是实验中必须要注意和避免的。
针对这种“花板"现象我们通过多次实验的分析和判断,总结了一些经验,分析如下:
1 标本、试剂、仪器
1.1 标本 出入境人员的血液标本。
1.2 试剂 HBsAg、HCV、HIV、梅毒试剂均为不同厂家的ELISA试剂盒。
1.3 仪器 LD4-2型脑心机BID RAD1575型洗板机BID RAD550酶标仪。
2 方法
所有被检出入境人员的血液标本,按照各个厂家提供的ELISA试剂盒说明书进行HBsAg-HCV-HIV梅毒等检验项目操作。所有试剂均在有效期内使用。
3 结果
所使用不同厂家的试剂有时会出现“花板"问题。
4 分析
在所有标本进行检测的过程中,所用的仪器及加样过程都处于正常状态的情况下,步骤均按照各种试剂说明书的要求去做,排除实验所用仪器和操作步骤对实验结果的影响外,ELISA试剂盒内的空白、阴性和阳性对照以及室内质控值都很正常,只有检测的血液标本情况异常。根据国家和疾控中心报告阳性率的比例不应该是很高的情况下,HBsAg在用ELISA之前都经过了快速金标试剂的检测,阳性标本得到了一定的控制。因此,原因可能是在标本的处理,特别是放置时间、离心速度和离心时间方面的问题。所以,标本的处理就成为实验结果的主要可疑因素。为了避免“花板"现象的出现,降低检测的假阳性率,获取准确的实验结果,应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便省时的ELISA试剂。使用ELISA试剂盒对血液HBsAg-HCV-HIV及梅毒等实验检测的结果中,空白和阴性,阳性对照以及室内质控孔结果正常,根据卫生部临检中心提供的数据,HBsAg0.5ng1ng-HCV-HIV梅毒正常范围均为2NCU,但血液标本孔的OD值比较高(大多数OD值≥0.070)。标本的阳性率很高,每板除对照孔外,有时阳性高达10孔之多,而大多数真阳性标本都出现弱阳性结果。
上海琛艺专业售后服务提供免费代测:
英文名称:Human glycosylated serum protein,GSP Elisa Kit
规格:96T/48T
性状:盒装液体
检测范围:欢迎前来索取原版说明书.
特异性:可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。
贮藏条件:2-8℃低温保存
种属包含:
——————人Elisa试剂盒
——————动物Elisa试剂盒
——————食品Elisa试剂盒
——————植物Elisa试剂盒
——————农产品Elisa试剂盒
——————微生物细胞Elisa试剂盒
——————其他测试盒。
性能:
1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2.灵敏度:zui低检测浓度小于10 pg/ml。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
欢迎咨询上海琛艺实业有限公司
血清标本可按常规方法采集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。本文将叙述板式ELISA试剂盒各个操纵步骤的留意要点,珠式、管式及磁性球ELSIA,国外试剂均与特殊仪器配合应用,严格遵照划定操纵,必能得出正确的结果。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可溅出,不可产气愤泡。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清,可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。
在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下倒置混和,不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝固、血*收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液,再在其加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体 或抗原成份,ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。
ELISA试剂盒的操纵因固相载体的形成不同而有所差异,海内医学检修一般均用板式点。除特殊情况外,在医学检修中均以血清作为检测标本。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。每次加标本应更换吸嘴,以发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。优质的试剂,良好的仪器和准确的操纵是保证ELISA试剂盒检测结果正确可靠的必要条件。ELISA顶用的蒸馏 水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。有些标本可直接进行测定(如血清 、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。
问题解答
若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后我公司为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
标准曲线差 | 吸取及洗涤不充分 | 充分的吸取及洗涤 |
移液不精确 | 检查和校正移液器 | |
精密度低 | 洗涤不充分 | 按说明书要求充分洗涤和浸泡 |
混匀不充分和吸取试剂不足 | 充分混匀和吸取试剂 | |
重复利用吸头、容器和覆膜 | 使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜 | |
加样不精确 | 检查和校正移液器 | |
O.D值低 | 每孔加的试剂量不精确 | 校正移液器,精确加入试剂 |
温育时间不正确 | 保证充足的温育时间 | |
温育温度不正确 | 试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度 | |
酶标记物或底物失效 | 通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查 | |
没有加入终止液 | 按照说明书实验操作步骤加入终止液 | |
超出读数时间读数 | 在说明书推荐的读数时间内读数 | |
样本值 | 不正确的样本储存方式 | 正确储存样本,使用新鲜样本进行实验 |
不正确的样本收集和处理方法 | 采取正确的样本收集和处理方法 | |
待测物质在样本中含量低 | 使用新鲜样本,重复实验 |
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