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HEK293细胞HEK293人胚肾细胞

更新时间:2019-09-08

简要描述:

产品名称:HEK293细胞HEK293人胚肾细胞
包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

【中文名称】HEK293细胞HEK293人胚肾细胞 

【背景资料】 见细胞说明书

【产品来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系

"公司提供贴壁、半贴壁、悬浮、半悬浮、贴壁与悬浮混合等细胞特性,一般细胞培养FBS

量是10%,如果出现细胞状态不良情况,可以提高FBS量到15%,待细胞稳定后,调回FBS量10%,对于初次实验者,一般细胞培养,都需要加入双抗防止细胞污染,细胞汇合度达到90%,我们开始寄送,这样可以保持细胞收到时,良好的细

胞活力。

 

  • 售前
        上海琛艺专业为国内科研提供高品质细胞和优质服务,QC检测合格后发货保证细胞状态良好,发货前保证质量。
     
    二、售后
        收到细胞7天内出现状态不佳等情况请及时反馈,会有技术同步指导操作协助解决,如仍未养活免费重发。建议及时保种,有备无患!
     
    三、细胞生长条件:

 

细胞系特征

 

培养条件:

 

 

 

完全培养基:90%RPMI-1640+10%胎牛血清

GIBCOFBS-10099-141或BI胎牛血清FBS-04-001-1ACS。

培养条件:37.0C  carbon dioxide(CO2),5%

传代方法:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

收到细胞后,在倒置镜下(是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,低速离心,打开细胞培养瓶,吸出培养液(注意不要吸出细胞),换 10ml新鲜培养液后继续培养。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 低速离心,弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中(补加完全培养基至8到10ml)。如果没有特别说明,收到细胞后的一次传代一般是一传二。

注:1、观察细胞在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞有脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请及时与我们联系。

冻存方法:

  冻存液:90%胎牛血清,10%DMSO

  储存:液氮储存

   

 

HEK293细胞HEK293人胚肾细胞 

四、细胞收到后处理
    细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液移入废液缸中,原瓶(T25瓶)保留6-8ml完全培养液,悬浮细胞需离心处理,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。
  

胞培养技术是指在动植物体外生长,并不再形成组织。培养物一般为细胞群,也可以是单个细胞,近年来,其已经成为很多生物制品的主要材料,并广泛应用于医学病理研究,本文针对细胞培养存在的一些常见问题进行分析研究并提出相应防控措施,现总结如下:

问题1:培养液pH值变化太快

可能原因:

(1)CO2张力不对

(2)培养瓶盖拧得太紧

(3)NaHCO3缓冲系统缓冲力不足

(4)培养液中盐浓度不正确

(5)细菌、酵母或真菌污染

建议解决方法:

(1)按培养液中NaHCO3浓度增加或减少培养箱内CO2浓度,2.0g/L到3.7g/L浓度NaHCO3对应CO2浓度为5%到10%。

(2)松开瓶盖1/4圈。

(3)改用不依赖CO2培养液。加HEPES缓冲液至10到25mM终浓度。

(4)在CO2培养环境中改用基于Earle′s盐配制的培养液,在大气培养环境中培养改用Hanks盐配制的培养液。

(5)丢弃培养物,或用抗生素除菌。

问题2:培养液出现沉淀,但pH值不变

可能原因:

(1)洗涤剂清洗后残留有磷酸盐,将培养基成分沉淀下来

(2)冰冻保存培养液

建议解决方法:

(1)用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后灭菌。

(2)将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。

问题3:培养液出现沉淀,同时pH发生变化

可能原因:

细菌或真菌污染

建议解决方法:

丢弃培养物,或用抗生素除菌。

 

上海琛艺实业有限公司上千株细胞由本公司专业的技术人员自己培养,其中几百株人源细胞已通过(STR鉴定),细胞现低价促销,需要下单请咨询销售陈。。。。。

 

 

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