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PLC/PRF/5人肝癌亚历山大细胞 已通过STR

更新时间:2019-09-21

简要描述:

PLC/PRF/5人肝癌亚历山大细胞 已通过STR
为什么培养的细胞要及时传代?
答:体外培养的细胞大多具有生长接触抑制的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。

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产品名称:PLC/PRF/5人肝癌亚历山大细胞 已通过STR

·         产品编号:PLC/PRF/5人肝癌亚历山大细胞 

·         细胞数量: 1*10^6

·         细胞种属: 人源

·         生长特性: 贴壁

·         培养基: DMEM-H

·         形态特征: 成纤维细胞样

·         传代方法: 1:3传代,2-3天传一代

·         培养条件: 胎牛血清至最终浓度为10%。环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;温度,37℃

·         细胞描述: 亲本L的亚克隆,是最早建立的连续传代细胞之一,L细胞源自100天的雄性C3H/An小鼠的皮下网眼状空隙和脂肪组织。APRT+,HPRT+。

·         细胞冻存: 液氮冻存(冻存液基础培养基+20%FBS+10%DMSO)

·         细胞运输: 干冰运输(2ml冻存管)或活细胞运输(T25瓶)

PLC/PRF/5人肝癌亚历山大细胞 已通过STR

形态特性 上皮细胞样  
生长特性 贴壁生长 
特征特性 CHO-HCV-C细胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能稳定表达C蛋白,是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。 
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-C培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS  
传代方法 1:3传代,2-3天传一代 
传代情况 C15 
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS  
细胞周期分为细胞间期和细胞分裂期,细胞间期较长,而细胞分裂期较短。
细胞间期是为细胞分裂的准备时期,表现为细胞增大,营养物质增多。细胞分裂期则是一个细胞由两个细胞分解为一个细胞的过程。
细胞是生命的基本单位,细胞的特殊性决定了个体的特殊性,因此,对细胞的深入研究是揭开生命奥秘、改造生命和征服疾病的关键。细胞生物学已经成为当代生物科学中发展较快的一门*学科,是生物、农学、医学、畜牧、水产和许多生物相关专业的一门必修课程。
依据细胞种类和浓度,于无菌操作台内取 10 ml培养基加至 T25或 T75 flask中。取出已解冻之细胞悬浮液,缓缓加入T25 或T75 flask 内之培养基, 混 合均匀,放入37 °C,5 % CO2 培养箱培养。

注意事项

冻存细胞接收后的处理:

1.干冰运输,收到细胞后立即转入-80℃冰箱短暂中转或直接复苏;
2.收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。

复苏细胞接收后的处理:

1.收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。
2.75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片,若有贴壁细胞脱落,可收集上清离心,将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。
3.建议收到当天不要消化处理,如果细胞长满90%,可选择传代处理。
4.如您收到细胞3天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。

 

注意事项:

1)细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以离心去掉,留10ml培养液培养观察,细胞生长至汇合度80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。

2)对于生长缓慢的贴壁细胞:可采用适当的提高培养基中血清浓度,或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。

3)对于生长不均的贴壁细胞:在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长,而旁边则为一块空白),此时可将细胞进行消化,重新打散,贴壁,加入新培养基进行培养。 

下面介绍几种细胞培养过程中常见的污染:

一)杆菌污染:培养基中加入抗生素可以减少此种污染,但也不是绝对的。

二)支原体污染:传说中的黑焦虫,长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。

三)念珠菌污染:似乎无处不在,而且顽固得很。长得暴快(12h就能在细胞上面密布)。培养液澄清。低倍显微镜下像黑色的沙子铺在细胞上,高倍镜下呈树枝状或葡萄状。

四)霉菌污染、比较常见的一种污染,常常来源于污染的空气、水和器械。

 

 

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