羊黑疫B型诺魏氏梭菌 ELISA试剂盒

中文名称：羊黑疫B型诺魏氏梭菌 ELISA试剂盒

规格：96T/48T

检测波长:450nm

所需样本体积：50-100ul

适用范围：仅供科研

库存：现货

保存及有效期:2-8℃,六个月

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。

例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑斧液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等

上海琛艺实业长期代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、猪、鸡、犬、猴子、羊、牛等种属elisa实验。

ELISA试剂盒的操作说明

 在ELISA试剂盒测定时，受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。抛开品牌、价格来说。
    选择ELISA试剂盒首要考虑这几个条件：

    1、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
    2、加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l，然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不 触及孔壁，小鼠ELISA试剂盒轻轻晃动混匀，
    3、温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
    4、配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
    5、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此 重复 5 次，拍干。
    测定标准浓度的抗原ELISA试剂盒反应的光密度绘制标准曲线。测得待测样品ELISA试剂盒反应的光密度，从而查得抗原量。在标记抗原竞争法中，定酶标记抗原的酶活性为100%，在加入作为标准样品的未标记抗原后，以酶活性降低的百分率绘制曲线，从曲线上查得待测抗原的量。至于对抗体的定量，则要绘制出竞争抵制曲线。在制作标准曲线时，需进行空白对照测定，进行校正。或者在测定时，将对照液作为零点测定点。

羊黑疫B型诺魏氏梭菌 ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。下面分析ELISA试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法。
一、选择试剂
选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
二、加样
可能原因：
1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；

2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)； 

3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法：
1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 

2) 加样后及时放入孵箱。 

3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 

4) 如果采用AT或其他全自动加样，选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 

5) 标本较多时，请分批操作。
三、 孵育
可能原因：
1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗*； 

2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。
解决办法：
1) 贴封片或加盖； 

2) 按说明步骤严格控制操作时间。
四、洗板
ELISA试剂盒可能原因：
1) 采用手工洗板，孔与孔之间液体交叉。 

2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不*；洗板针堵塞，抽吸不*；洗板不畅，导致洗板效果差。

 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。
解决办法：
1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干； 

2) 合理安排，或多用几台洗板机。
五、显色
可能原因：
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂； 

2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。
elisa试剂盒研发解决办法： 

1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用； 

2) 加样时保持显色剂不外流； 

3) A、B液应避免接触金属器械。
六、终止
可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
七、读板
如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸； 尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。
ELISA试剂盒在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时作好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪，这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

 公司销售elisa试剂盒产品齐全，产品质量在客户使用中得到较高评价。部分试剂盒使用进口原装r&d抗体包被，具有特异性强，灵敏度高，重复性高等特点。购买我公司产品可免费代测。


三 订购信息：