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山羊睾酮(T)ELISA试剂盒

更新时间:2019-09-23

简要描述:

山羊睾酮(T)ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。下面分析ELISA试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法。

中文名称:山羊睾酮(T)ELISA试剂盒

规格:96T/48T

检测波长:450nm

所需样本体积:50-100ul

适用范围:仅供科研

库存:现货

保存及有效期:2-8℃,六个月

检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。

例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑斧液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。

琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELSA试剂盒等

上海琛艺实业长期代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、猪、鸡、犬、猴子、羊、牛等种属elisa实验。

ELISA试剂盒的操作说明

 在ELISA试剂盒测定时,受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。抛开品牌、价格来说。
    选择ELISA试剂盒首要考虑这几个条件:

    1、编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
    2、加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50?l。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40?l,然后再加待测样品 10?l。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不 触及孔壁,小鼠ELISA试剂盒轻轻晃动混匀,
    3、温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
    4、配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
    5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
    测定标准浓度的抗原ELISA试剂盒反应的光密度绘制标准曲线。测得待测样品ELISA试剂盒反应的光密度,从而查得抗原量。在标记抗原竞争法中,定酶标记抗原的酶活性为100%,在加入作为标准样品的未标记抗原后,以酶活性降低的百分率绘制曲线,从曲线上查得待测抗原的量。至于对抗体的定量,则要绘制出竞争抵制曲线。在制作标准曲线时,需进行空白对照测定,进行校正。或者在测定时,将对照液作为零点测定点。

山羊睾酮(T)ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。下面分析ELISA试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法。
一、选择试剂
选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
二、加样
可能原因:
1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;

2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时); 

3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。
解决办法:
1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 

2) 加样后及时放入孵箱。 

3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 

4) 如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 

5) 标本较多时,请分批操作。
三、 孵育
可能原因:
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底; 

2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
解决办法:
1) 贴封片或加盖; 

2) 按说明步骤严格控制操作时间。
四、洗板
ELISA试剂盒可能原因:
1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 

2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。

 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。
解决办法:
1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干; 

2) 合理安排,或多用几台洗板机。
五、显色
可能原因:
1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 

2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。
elisa试剂盒研发解决办法: 

1) 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 

2) 加样时保持显色剂不外流; 

3) A、B液应避免接触金属器械。
六、终止
可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
七、读板
如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。所以在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸; 尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。
ELISA试剂盒在实际操作中,除了选择优良试剂外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时作好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。现在国内已有相当数量的单位拥有全自动酶标仪,这对于实现ELISA标准化检测、提高检测质量起到了重要作用。

 公司销售elisa试剂盒产品齐全,产品质量在客户使用中得到较高评价。部分试剂盒使用进口原装r&d抗体包被,具有特异性强,灵敏度高,重复性高等特点。购买我公司产品可免费代测。


三 订购信息:

产品名称

规格

贮存条件

检测方法

货期

价格

ELISA试剂盒

48t/96t

在2-8℃

双抗体夹心法

现货

本品供两种型号(国产,进口r&d抗体包被)

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