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143B/LUC人骨肉瘤细胞 荧光素酶标记 含STR

更新时间:2019-12-10

简要描述:

143B/LUC人骨肉瘤细胞 荧光素酶标记 含STR
购买琛艺细胞注意事项发布
  一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
  收到细胞未开封,出现污染我们负责免费发送一株细胞

上海琛艺实业有限公司经过数年的努力发展已迅速成为集产品研发、生产、经营为一体的专业化生物工程公司。公司新引进细胞上千株,其中人的已通过STR鉴定的有几百株,欢迎各位选购。。。。。。

产品名称:143B/LUC人骨肉瘤细胞 荧光素酶标记 含STR

包装:内层无菌自封袋;专用防压泡沫盒;外层防压保温气泡袋;说明书
细胞来源:ATCC、sciencell、ICLC
货期:1-2周
运输方式:快递运输
售后:收到细胞后12天,如发现细胞有质量问题(如污染,死亡,快递运输等原因)时,应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员,我们将尽快为您解决!

 

143B/LUC人骨肉瘤细胞 荧光素酶标记 含STR
三、细胞生长条件:
 

培养步骤:

1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

 

1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入血清及DMSO,冻存比例为90%FBS+10%DMSO。

 

PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。

 

四、注意事项:

1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。

2 瓶中运输的培养液不能重复使用,请换新鲜培养液培养

3 对于贴壁细胞,若大部分细胞漂浮,置于培养箱隔夜观察,大部分漂浮细胞重新贴壁,表明细胞活力正常,继续培养,剩余漂浮的细胞可以去掉;若大部分细胞仍然不贴壁,将漂浮的细胞离心收集,用台盼蓝染色鉴定细胞活力,并与本公司销售人员及时联系。

4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片,记录细胞状态,如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系,以便于更好的帮您解决问题,超过时间我段,本公司则默认细胞状态良好,不免费对后续细胞状态问题进行售后。

多肝细胞是多倍体,含有4倍、8倍、16倍或更多倍的单倍体染色体组,尽管这一现象的重要性并不清楚。

        现在,用小鼠所进行的一项研究表明,肝细胞在活体中既可增加也可降低它们的多倍性。多倍性逆转以前被认为是减数分裂所独有的,但这项工作表明,它也可出现在正常体细胞中。

        多倍性的增加是通过失败的胞质分裂出现的,而多倍性的减少则是多极性有丝分裂的一个结果。所导致的遗传异质性在肝受伤之后也许是有利的,在这个时候,具有遗传稳定性的细胞将会从事先存在的一组多样化基因型中被选择出来。

 

当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。 高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是我司推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤: 

1.在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。 
2.分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。 

3.每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。 

4.确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2~3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2~3代。

5.在无抗生素的培养基中培养细胞一代。

6.重复步骤4。

7.在无抗生素的培养基中培养4~6代,确定污染是否以已被消除。 

    我司分析细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程。

做细胞实验的同学看过来。

选择上海琛艺生物细胞有3个理由:

1、细胞状态好,形态佳,易成活,是市面上比较好养的细胞之一;

2、物流迅速,复苏好后发货,次日就能到;

3、使用我司推荐的进口品牌血清进行培养实验,效果更佳。

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