更新时间：2023-05-10
产品名称：hs 68细胞|人男性正常生殖细胞系 含STR包装：内层无菌自封袋；防压泡沫盒；外层防压保温气泡袋；说明书细胞来源：ATCC、sciencell、ICLC货期：1-2周运输方式：快递运输售后：收到细胞后12天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时通知销售人员，我们将尽快为您解决！注：耐药细胞培养操作流程和普通细胞培养方法
| 品牌 | 自营品牌 | 货号 | hs 68细胞 |
|---|---|---|---|
| 规格 | T25 10的六次方 | 供货周期 | 现货 |
| 主要用途 | 医院及其研究所科研实验 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,石油 |
hs 68细胞|人男性正常生殖细胞系 含STR
组份 | 数目 |
细胞 | 1 T-25瓶 |
细胞说明书 | 一份 |
生长特性： | 贴壁生长
|
细胞来源： | 从ATCC/中科院/协和医院等地引进 |
培养条件： | 培养基：90%1640培养基 +10%FBS（推荐BI -04-001-1ACS*胎牛血清） 气相：空气95%，二氧化碳5% 温度：37℃ |
培养： |
1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行2-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉，再往其中加入5-6mL新鲜培养基并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代； 2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，第yi次传代比例为1:2。 3传代步骤：将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入1mlPBS，轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第yi次消化需时常取出置于显微镜下观察，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为*消化时间，记录*消化时间，以便于下次消化），消化好后加入1ml*培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min，弃上清，加入*培养基重悬细胞，进行传代。
二、悬浮细胞 1.用75%酒精喷洒整个瓶消毒，然后置于无菌操作台，打开瓶口，轻轻吹打后，将其中的细胞悬液转移到离心管中，然后1200rpm离心3min，去上清； 2.将离心好的细胞转移至T-25瓶中，并加入5-6mL新鲜培养基，然后将其置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液（离心后去旧液，加入新鲜培养基）； 3.显微镜观察细胞数目比较多时，对其进行传代，第yi次传代比例为1:2（离心后平均分成两瓶培养）。
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细胞总数： | 1~3*106 |
传代周期： | 2-3天 |
传代比例： | 1:2~1:4 |
换液频率： | 2-3天 |
冻存液： | 90%FBS+10%DMSO |
四、注意事项：
1 收到细胞后首先观察T-25瓶是否有损坏、漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2 瓶中运输的培养液不能重复使用，请换新鲜培养液培养
3 对于贴壁细胞，若大部分细胞漂浮，置于培养箱隔夜观察，大部分漂浮细胞重新贴壁，表明细胞活力正常，继续培养，剩余漂浮的细胞可以去掉；若大部分细胞仍然不贴壁，将漂浮的细胞离心收集，用台盼蓝染色鉴定细胞活力，并与本公司销售人员及时联系。
4 建议客户收到细胞后不同倍镜各拍几张细胞的照片，记录细胞状态，如细胞状态出现问题请于72h内与本公司销售联系，以便于更好的帮您解决问题，超过时间我段，本公司则默认细胞状态良好，不免费对后续细胞状态问题进行售后。
hs 68细胞|人男性正常生殖细胞系 含STR-如何培养该细胞?
细胞培养是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究与生物工程中基本的实验技术。
细胞培养为疫苗生产、药物研制与肿瘤防治等医学实践提供了全新的手段。细胞培养包括原核生物细胞，入细菌;真核单细胞生物，入酵母菌、四膜虫等;植物细胞与细胞的培养以及于此密切相关的病毒的培养。
细胞培养
体外培养的细胞可分为原代细胞(primary culture cell)与传代细胞(subculture cell)。原代细胞是指机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养，适应在体外培养下条件下持续传代培养的细胞称为传代细胞。
分散的细胞悬液在培养瓶中很快(在几十分钟至数小时内)就贴附在瓶壁上，这就称为细胞贴壁。
分散呈圆球形的细胞一经贴壁就迅速铺展并开始有丝分裂，逐渐形成致密的细胞单层，称为单层细胞(sigle layer cell),这种培养方法称为单层细胞培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察Ⅱ型肺泡上皮细胞|细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
如果漂浮的死细胞多，说明细胞有很多老化的，建议每次传代的时候，在用胰酶消化之前，用PBS将细胞漂洗一遍，胰酶消化的时间要把握好，37℃2-3min即可，及时终止反应，否则胰酶消化过度对细胞损伤较大，也会有很多死细胞出现的;吹打细胞的动作要轻柔。
体外培养的细胞，不论是元代细胞还是传代细胞一般不包吃体内原有的细胞形态。但大体可以分为两种基本形态：成纤维样细胞(fibroblast like cell)与上皮样细胞(epitbelial like cell)。此外还有一些可移动的游走细胞。
做细胞实验的同学看过来。
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