产品中心您现在的位置:首页 > 产品展示 > 感受态细胞 > 非电转感受态细胞 > DH5α感受态细胞 20×100ul非电转

DH5α感受态细胞 20×100ul非电转

更新时间:2019-11-19

简要描述:

DH5α感受态细胞 20×100ul非电转
DH5α 感受态细胞100ul*20运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

DH5α感受态细胞 20×100ul非电转

 产品编号 产品名称规格 价格 
 CY1100 DH5α感受态细胞 20×100 μl 300.00

DH5α 感受态细胞说明书 
货 号:C1100                    
规 格:10×100ul / 20×100ul 
保 存:-70℃保存,运输为干冰包装。自收货之日起液氮保存至少一年,-70 ℃保存至少 6 个月。 
产品简介: 
本公司生产的DH5 α 感受态细胞是采用大肠杆菌DH5 α 菌株经特殊工艺制备得到,可用于DNA的化学转化。使用pUC19 质粒检测,转化效率可达 108,-70 ℃保存3-5 个月转化效率不发生改变。 基因型:   supE44 △lacU169 (φ80 lacZ△M15 )hsdR17 recA1 end A1 gyrA96 thi-1 relA1 
特   点:  一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重组缺陷的抑制型菌株。其 φ80 lacZ△M15 基因的产物可与pUC 载体编码的  β-半乳糖苷酶氨基端实现β 互补,可用于蓝白斑筛选。 
操作方法:(以下操作均按无菌条件的标准进行) 
1 、将感受态细胞置于冰上融化,以下实验以 100ul 感受态细胞为例。 
2 、向感受态细胞悬液中加入需转化的目的 DNA,注意目的DNA的体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一,轻轻旋转离心管以混匀内容物,冰浴放置30 分钟。 
3 、将离心管置于 42℃水浴中放置 60-90 秒,然后快速转移到冰浴中放置 2-3 分钟,注意不要摇动离心管。 
4 、向离心管中加入 500ul 无菌无抗的SOC 或LB培养基,37℃ 180rpm 振荡培养1 小时。目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达,使菌体复苏。 
5 、取适量已转化的感受态细胞涂布含相应抗生素的 SOC 或LB平板,37℃倒置培养 12-16 小时。涂布用量可根据具体实验来调整,如转化的DNA总量较多,可取100ul 左右的转化产物涂板;反之,如转化的 DNA总量较少,可取200-300ul 的转化产物涂板。过多菌液可以抑制细菌生长。如果预计的*较少,可通过离心后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。涂布剩余的菌液可4 ℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新的平板。 
注意事项:  
 1、感受态细胞应保存在-70 ℃,不可反复冻融,否则其转化效率将会降低。  
 2、实验过程中应严格无菌操作,防止其它 DNA的污染,避免为以后的筛选、鉴定带来影响。  
 3、转化时,转化效率与外源 DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA量过多或体积过大反而会降低转化效率。转化时DNA体积要小于感受态细胞体积的十分之一。  
 4、转化率的计算:转化率=产生菌落的总数/ 铺板DNA总量。  
 5、为防止转化实验不成功,可以保留部分连接产物,以重新转化,将损失降到低。 
相关产品: 
  I1020   IPTG 溶液 (50mg/ml) 
  A1170   氨苄青霉素储存液( 100mg/ml) 
  K1030   Kanamyci n (100mg/ml)卡那霉素 
  L1015   LB固体培养基(干粉) 
  L1020   SOC液体培养基(干粉)  
  X1010   X-gal(20mg/ml)

DH5α感受态细胞 20×100ul非电转

不同感受态细胞基因型不一样,因此有不同的用途:
1、DH5α 是实验室常用的感受态,用于克隆的,构建质粒,建库,保存质粒,等等。
2、DH10β可用于重组克隆的蓝/白斑筛选,允许构建更多具有代表性的基因组文库,可以增加质粒产量和数量
3、 Stbl3可以抑制重组,适合转化不稳定质粒,可用于保存慢病毒质粒。
4、JM109适合重复基因表达,分子克隆、质粒提取和蛋白质表达,可用于M13克隆序列测定和蓝白斑筛选。
5、 BL21(DE3)是常用来表达蛋白的,如果用于保存质粒,质粒会很不稳定。
快速转化操作方法 (10min)
1. 提前15分钟将用到的筛选培养基平板拿到37℃预热。
2.DH5αλpir 感受态细胞100ul*20价格从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手EP管底轻轻混匀,,冰中静置5分钟。
3. 用200 μl枪将感受态细胞-DNA混合物转移到已经37℃预热的LB培养基上,涂均匀,表面无水渍。
4. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作,将平板放37℃培养至少15h。

产品类目:

1.细胞培养试剂,2.细胞培养耗材,3.蛋白质提取,4.蛋白质纯化,5.蛋白质定量,6.蛋白质电泳,7.蛋白质Marker,8.Western blot,9.免疫组化,10.抗体,11.SABC试剂盒,12.基因组和质粒提取试剂盒,13.核酸提取相关试剂,14.DNA电泳,15.DNA Marker,16.RNA相关试剂,17.PCR,18.Southern blot,19.基因工程,20.生物培养,21.碱基与核酸,22.氨基酸,23.多肽及蛋白质,24.酶,25.辅酶,26.酶抑制剂,27.维生素,28.抗生素,29.染色剂,30.糖与碳水化合物,31.生物缓冲液,32.植物生长激素,33.酸和盐分离效,34.胺,35.层析介质,36.常用生化试剂,37.其他生化试剂,38.耗材,39.标准品,40.新增产品

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
上海琛艺实业有限公司

地址:上海市普陀区真南路701弄14号商务楼

版权所有:上海琛艺实业有限公司  备案号:沪ICP备19043069号-1  总访问量:57893  站点地图  技术支持:化工仪器网  管理登陆

QQ在线客服
联系方式

021-39598508