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人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒

更新时间:2019-11-25

简要描述:

人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒上海琛艺为您专业现货供应,包括:大鼠ELISA试剂盒、小鼠ELISA试剂盒、人ELISA试剂盒、豚鼠ELISA试剂盒、植物ELISA试剂盒等种类齐全,价格优惠、品质保证。

 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中人β内酰胺酶(β-lactamase)的含量。

l  有效期:6个月

l  保存条件:2-8℃

 

人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人β内酰胺酶(β-lactamase)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人β内酰胺酶(β-lactamase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

人β内酰胺酶(β-lactamase)ELISA试剂盒样本处理及要求

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.  细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

需要而未提供的试剂和器材

1.     酶标仪(450nm)

2.     高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.     37℃恒温箱

4.     蒸馏水或去离子水

 

 

人ELISA试剂盒使用说明书

科研ELISA试剂盒标本的采纳和保存
可用作科研ELISA试剂盒测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同即是血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清天然凝结、xue块缩短后即可获得。除特殊情况外,在医学查验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等使用。血清标本可按惯例方法收集,应留心防止溶血,红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本或许会增加非特异性显色。

血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中或许含有内源性HRP,也会发生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其间的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超越一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,防止气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价下跌,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少数分装冰存。保存血清自收集时就应留心无菌操纵,也可加进适当防腐剂。

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

实验结果计算

以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。

 

试剂盒性能

1.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

2.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

注释:本公司所有产品仅用于科研,不得用于临床。

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